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El cultivo celular implica la inoculación celular, el cultivo, la recolección y otros procesos. Las células en el frascos de cultivo celular han crecido hasta cierto punto y es necesario recolectarlas. En este momento, las células de la pared del matraz deben digerirse con tripsina y luego recolectarse. El tiempo de digestión debe controlarse durante el uso de pancreatina.
La tripsina es una proteasa heterogénea que puede degradar la proteína de la membrana celular y de los frascos de cultivo celular. Al degradar la proteína en un lugar específico, la proteína en la unión entre las proteínas se degrada y las células se vuelven esféricas debido a la tensión de su citoesqueleto interno, lo que separa las células. El grado de digestión de la tripsina es un paso clave en el cultivo celular: aumentan los desechos celulares excesivamente digeridos, aumenta la escoria negra, las células se caen en pedazos, lo que afecta gravemente la viabilidad celular, y algunas células flotan y se pierden con la tripsina descartada; Digestión insuficiente, las células son difíciles de expulsar de la pared de la botella, el pipeteo repetido también dañará la viabilidad celular.
Diferentes tejidos o células reaccionan de manera diferente a la acción de la pancreatina. La actividad de las células dispersas de pancreatina también está relacionada con su concentración, temperatura y tiempo de acción. Cuando el pH es 8,0 y la temperatura es 37, la capacidad de acción de la solución de pancreatina es relativamente fuerte. Al usar pancreatina, se debe controlar la concentración, la temperatura y el tiempo para evitar el daño celular causado por la sobredigestión. Debido a que el Ca2+, el Mg2+, el suero y las proteínas pueden reducir la actividad de la pancreatina, se debe usar BSS sin Ca2+ ni Mg2+ al preparar una solución de pancreatina, como la solución D-Hanks. Al terminar la digestión, use un medio de cultivo que contenga suero o un inhibidor de tripsina para detener el efecto de la pancreatina en las células.
Además, si se trata de una célula recién comprada, primero puede usar una concentración baja de tripsina para averiguar la digestión tiempo, y observe si las celdas son redondas cada minuto y haga un registro. En resumen, al recolectar las células en el frascos de cultivo celular, se debe controlar el tiempo de digestión de la tripsina para mantener la viabilidad celular.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.