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La contaminación por micoplasma es un problema muy común cuando se cultivan células en cell factory. A diferencia de otras contaminaciones, las células contaminadas con micoplasma generalmente no se vuelven turbias, por lo que es difícil juzgarlas a simple vista. Hay cuatro formas de determinar si las células están contaminadas con micoplasma:
1. Tinción de fluorescencia de ADN
El método de tinción de fluorescencia de ADN se basa en el principio de que el colorante fluorescente Hoechst33258 puede unirse a la región rica en bases AT en el ADN de micoplasma. Los puntos fluorescentes son ADN de micoplasma rico en regiones base AT.
2. Tecnología PCR
Se diseñan los cebadores específicos según las secuencias conservadas en el genoma de Mycoplasma, se amplifica el ácido nucleico de la muestra a ensayar y se realiza el diagnóstico analizando el tamaño del producto amplificado. La tecnología de detección de PCR se utiliza para la detección de contaminación por micoplasma, con ciclo corto, alta sensibilidad, buena especificidad, operación simple y puede detectar una gran cantidad de muestras a la vez.
3. El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA)
ELISA se utiliza en la detección de contaminación por micoplasma, con buena especificidad y sensibilidad, y puede completar la detección de una gran cantidad de muestras a la vez. Tiene las características de detección cualitativa simple, rápida y cuantitativa.
4. Microscopio electrónico
Generalmente, las células en las fábricas de células se cultivan durante 48 a 72 horas. Antes de que las células sean casi confluentes, las células se digieren con tripsina para hacer una suspensión de células, se fijan, se incrustan y se cortan antes de la observación.
Los anteriores son cuatro métodos de detección comúnmente utilizados cuando se detecta contaminación por micoplasma en fábricas de células. En la actualidad, se sabe que hay más de 20 tipos de micoplasmas que contaminan las células, de los cuales más del 95 % son micoplasmas orales, por lo que los operadores deben prestar atención a la operación aséptica al cultivar células.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.