Pruebas de citotoxicidad de fábricas de células.

Thu May 19 09:56:44 CST 2022

La citotoxicidad es un evento puramente destructor de células causado por células o sustancias químicas que no depende de la apoptosis o la necrosis como mecanismo de muerte celular. A través de esta prueba, se puede juzgar si las materias primas de cell factory contienen sustancias que no favorecen el crecimiento celular.

Cytotoxicity es el efecto de las sustancias químicas (drogas) en la estructura básica y /o proceso fisiológico de las células, como la membrana celular o la estructura del citoesqueleto, el proceso del metabolismo celular, la síntesis, la degradación o la liberación de componentes o productos celulares, la regulación iónica y la división celular y otros procesos, que conducen a trastornos de la supervivencia, proliferación y/o función, dando lugar a reacciones adversas. En general, la prueba de si una fábrica de células es citotóxica se puede realizar mediante los siguientes métodos:

1. Métodos MTT y XTT: utilizando la actividad de las enzimas dentro de las mitocondrias, se pueden convertir sales de tetrazolio específicas y luego detectarlas mediante un lector de microplacas;

2. Método LDH: la citotoxicidad se detecta detectando la actividad enzimática de LDH en el sobrenadante del cultivo celular;

3. Otros métodos enzimáticos: como detectar las actividades de fosfatasa alcalina y fosfatasa ácida en el sobrenadante;

4. Kit de análisis de proliferación celular: las células normales tienen un metabolismo vigoroso y la succinato deshidrogenasa en sus mitocondrias puede reducir las sales de tetrazolio (como MTT, XTT, WST-1, etc.) a sustancias cristalinas púrpuras, depositadas alrededor de las células y luego leer el OD valor por un lector de microplacas para detectar el estado de proliferación celular.

5. Detección de la viabilidad celular mediante el método de luminiscencia de fluoresceína: la adenilato quinasa (AK) existe en el citoplasma de todas las células eucariotas y procariotas, y la AK puede activar el ADP para generar ATP. Cuando se dañan las células, se daña la membrana celular y se libera AK en el sobrenadante del cultivo. El kit utiliza luciferasa y luciferina para emitir luz bajo la acción de ATP, y puede detectarse cuantitativamente mediante un instrumento de quimioluminiscencia.

La prueba de si una fábrica de células tiene citotoxicidad se puede llevar a cabo de varias maneras, y esta prueba también es una de los elementos de prueba de rutina para garantizar la calidad de los consumibles de cultivo celular.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.