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Frascos de cultivo celulartienen cuello recto, tortícolis, cuello en ángulo, triángulo, rectángulo, etc. según diferentes formas. Las especificaciones incluyen 25 ml, 75 ml, 175 ml y 250 ml. Los tamaños más pequeños se utilizan principalmente para el paso de células, la conservación de células y la provisión de células para experimentos, etc. use.
Después de que las células crezcan hasta convertirse en una monocapa densa en el matraz de cultivo celular, son básicamente saturado. Para permitir que las células continúen creciendo y aumentando el número de células, deben ser subcultivadas (re-cultivadas). El subcultivo también es una forma de preservar las especies celulares. Al mismo tiempo, es un proceso necesario para varios experimentos que utilizan células cultivadas. Las células suspendidas se pueden separar directamente, mientras que las células adherentes deben digerirse antes de poder separarlas. Los pasos específicos son los siguientes:
1. Desechar el medio de cultivo original en el matraz de cultivo celular lleno de células.
2. Agregue de 0,5 a 1 ml de solución de pancreatina al 0,25 %, de modo que las células del fondo del frasco queden sumergidas en la solución.
3. Coloque un tapón de goma en la botella y colóquela bajo un microscopio invertido para observar las células. Con el paso del tiempo, las células adherentes originales tendieron gradualmente a ser redondas, y la pancreatina se descartó cuando las células aún no habían flotado, y se añadieron 10 ml de medio de cultivo para terminar la digestión. La observación de la digestión también se puede hacer a simple vista. Cuando el fondo de la botella se ve blanco y aparecen pequeños agujeros, la digestión puede terminar. Generalmente, el tiempo de digestión a temperatura ambiente es de aproximadamente 1-3 minutos.
4. Use una pipeta para soplar las células adherentes en una suspensión, divídalas en dos o tres botellas, tape la solución de cultivo con un tapón de goma y colóquela a 37 °C para continuar con el cultivo. Observe el crecimiento adherente al día siguiente.
Lo anterior es la aplicación de frascos de cultivo celular en pases celulares. El método de preparación de la solución de digestión es el siguiente: pesar 0,25 g de tripsina (actividad 1:250), agregar 100 ml de solución de Hank libre de Ca2+, Mg2+ para disolver, filtrar, esterilizar por filtración, almacenar a 4 °C y volver a la temperatura de 37 °C antes de su uso. También se puede añadir EDTA a la solución de pancreatina para que la concentración final alcance el 0,02%.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.