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Bei der Kultivierung verschiedener Zellen sind Zellkulturflaschen eine Art Zellkultur-Verbrauchsmaterial, das häufiger verwendet wird. Sie werden hauptsächlich für die Kultur adhärenter Zellen verwendet und die Spezifikationen reichen von 25 ml bis 225 ml. Das Hamster-Nierenzellkulturmedium verwendet dieses Verbrauchsmaterial, und die spezifischen Schritte seiner Kultivierung sind wie folgt:
1. Vorarbeiten für die Zellkultur:
1) MEM-Medium vorbereiten; hochwertiges fötales Rinderserum, 10 %; Doppelantikörper 1 %.
2) Kulturbedingungen: Gasphase: Luft, 95 %; Kohlendioxid, 5%. Temperatur: 37 Grad Celsius, Luftfeuchtigkeit des Inkubators 70–80 %.
3) Gefrierlösung: 90 % Serum, 10 % DMSO, gebrauchsfertig.
2. Zellverarbeitung:
1) Gewinnung kryokonservierter Zellen: Das kryokonservierte Röhrchen mit 1 ml Zellsuspension schnell schütteln und in einem 37 °C warmen Wasserbad auftauen, in ein Zentrifugenröhrchen mit 4–6 ml Vollmedium geben und mischen Gut. Zentrifugieren Sie bei 1000 U/min für 3-5 Minuten, verwerfen Sie den Überstand und resuspendieren Sie die Zellen in vollständigem Medium. Die Zellsuspension wurde dann in eine Zellkulturflasche gegeben, die 6–8 ml vollständiges Medium enthielt, und über Nacht bei 37°C kultiviert. Zellwachstum und Zelldichte wurden am nächsten Tag unter einem Mikroskop beobachtet.
2) Zellpassage: Wenn die Zelldichte 80%-90% erreicht, kann eine Subkultur erfolgen.
3) Kryokonservierung von Zellen: Nach Erhalt der Zellen, wird empfohlen, eine Charge Zellsamen in den ersten 3 Kulturpassagen für nachfolgende Experimente einzufrieren.
Die obigen Schritte sind die spezifischen Schritte für die Kultivierung von Hamsternierenzellen in Zellkulturflaschen. Wenn Zellen kryokonserviert werden, sammeln Sie außerdem die verdauten Zellen in einem Zentrifugenröhrchen gemäß dem Prozess der Zellpassage und verwenden Sie ein Hämozytometer, um sie zu zählen, um die Kryokonservierungsdichte der Zellen zu bestimmen. Die empfohlene Gefrierdichte allgemeiner Zellen beträgt 1 x 106 bis 1 x 107 lebensfähige Zellen/ml.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.