English
Zellpassage bezieht sich auf den Vorgang des Teilens der Kultur in kleine Teile, erneutes Aussäen in einem anderen Kulturgefäß und anschließendes Kultivieren. Zellkulturflaschen sind ein übliches Verbrauchsmaterial beim Passagieren, also was sind die spezifischen Schritte der Zellpassage?
1. Nehmen Sie die Zellkulturflaschen aus dem Inkubator, sprühen Sie 75 % Alkohol mit einer Alkoholsprühdose auf die Oberfläche der Flasche und übertragen Sie sie auf den Ultra-Clean-Tisch.
2. Öffnen Sie den Deckel, saugen Sie das alte Kulturmedium vorsichtig ab, fügen Sie eine angemessene Menge PBS-Puffer hinzu, um es 1-2 Mal mit einer Pasteur-Pipette zu waschen, und entsorgen Sie den PBS-Puffer.
3. Verwenden Sie eine Pipette, um 1–2 ml Pankreatin hinzuzufügen, und schütteln Sie das „Kreuz“, damit das Pankreatin vollständig mit den Zellen in Kontakt kommt.
4. Übertragen Sie die Zellkulturflasche mit Trypsin auf die umgekehrte Mikroskopstufe und beobachten Sie die Zellverdauung unter dem Mikroskop. Wenn die Zellen rund werden und in großen Mengen abfallen, bereiten Sie sich darauf vor, die Verdauung zu beenden. Besprühen Sie die Oberfläche der Flasche mit 75 %igem Alkohol und übertragen Sie sie auf das Super Net Taiwan.
5. Verwenden Sie eine Pipette (oder Pasteurpipette), um eine gleiche Menge serumhaltiges Medium hinzuzufügen, um den Verdau zu beenden. Gründlich pipettieren, damit die Zellen vollständig abfallen können.
6. Übertragen Sie die gemischte Flüssigkeit in der Flasche in ein Zentrifugenröhrchen, balancieren Sie es aus und zentrifugieren Sie etwa 5 Minuten lang.
7. Besprühen Sie nach der Zentrifugation die Oberfläche des Zentrifugenröhrchens mit einer Alkoholsprühdose, übertragen Sie es auf den Ultra-Clean-Tisch, öffnen Sie den Deckel und gießen Sie den Überstand in den Abfallbehälter.
8. Geben Sie ein geeignetes Volumen serumhaltiges Medium hinzu und pipettieren Sie vorsichtig mit einer Pipette oder Pasteurpipette, um eine Zellsuspension herzustellen.
9. Teilen Sie die Zellsuspension in 2 (oder mehr) saubere, sterile Kulturflaschen auf, fügen Sie die entsprechende Menge Kulturmedium hinzu und schließen Sie den Deckel.
10. Legen Sie den aliquotierten Kulturkolben auf die Bühne des inversen Mikroskops und beobachten Sie den Zellzustand. Die Anzahl der Zellen sollte gewährleistet sein. Eine zu kleine Zahl beeinträchtigt das Wachstum.
11. Markieren Sie die Flasche, um die Durchlaufzeit, den Zelltyp, den Bediener und andere Informationen anzugeben. Bevor Sie ihn in den Inkubator stellen, besprühen Sie die Oberfläche des Flaschenkörpers erneut mit Alkohol, reinigen Sie den Operationstisch, wischen Sie die Oberfläche des ultrareinen Tisches mit 75 %igem Alkohol ab und reinigen Sie Abfallflüssigkeit und Abfall.
The oben ist der spezifische Prozess der Verwendung von Zellkulturflaschen für die Zellpassage. Beachten Sie, dass Sie während des Betriebs sterile Kleidung, sterile Handschuhe und Masken tragen und während des gesamten Prozesses auf aseptische Abläufe achten sollten, um eine Zellkontamination zu vermeiden.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.