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Die Kryokonservierung von Zellen ist eine Technik, die Zellen in eine Umgebung mit niedriger Temperatur bringt, um den Zellstoffwechsel für die Langzeitlagerung zu reduzieren. Neben dem Schutz von Zellen wird diese Technologie häufig zum Kauf, Verschenken, Tauschen und Transportieren bestimmter Zellen eingesetzt. Wie transferieren wir also kryokonservierte Zellen in Zellkulturflaschen?
Die gefrorenen Zellen müssen wiederbelebt werden, bevor die nächste Operation durchgeführt werden kann. Die Wiederbelebung der Zellen sollte schnell erfolgen, damit die Lebensfähigkeit der Zellen gut erhalten werden kann. Die Operation kann wie folgt durchgeführt werden:
1. Prüfen Sie nach Erhalt der Zellen, ob die Umverpackung vollständig ist; Öffnen Sie die Umverpackung und nehmen Sie die in Trockeneis gelagerten Zellen heraus;
2. Überprüfen Sie, ob das Kryokonservierungsröhrchen beschädigt ist, ob der Inhalt geschmolzen ist, und legen Sie das entfernte Kryokonservierungsröhrchen zum Schmelzen schnell in ein 37℃ Wasserbad;
3. Das Kryokonservierungsröhrchen wird mit 75 %igem Alkohol desinfiziert und in eine biologische Sicherheitswerkbank gestellt;
4. Geben Sie 5 ml Vollmedium in ein 15-ml-Zentrifugenröhrchen zur Verwendung;
5 Geben Sie die Zellsuspension in das Kryokonservierungsröhrchen zum vorbereiteten Medium und mischen Sie es vorsichtig;
6. Setzen Sie das 15-ml-Zentrifugenröhrchen in die Zentrifuge und zentrifugieren Sie bei 1000 U/min (ca. 200 g) für 3-5 Minuten;
7. Fügen Sie 5 ml vollständiges Medium zur Verwendung in eine 25-ml-Zellkulturflasche hinzu;
8. Nehmen Sie die zentrifugierten Zellen heraus, sterilisieren Sie sie mit Alkohol und legen Sie sie in einen sicheren Schrank;
9. Den zentrifugierten Zellüberstand vorsichtig absaugen, 1 ml Vollmedium hinzufügen, um die Zellen zu resuspendieren;
10. Die resuspendierten Zellen in die vorbereitete Zellkulturflasche geben und vorsichtig mischen;
11. Beobachten Sie den Zustand und die Dichte der inokulierten Zellen unter einem Mikroskop und stellen Sie die Kulturflasche für die Kultur in einen Inkubator mit 37 °C.
Im Prozess der Zellwiederherstellung kann eine schnelle Fusion sicherstellen, dass die extrazellulären Kristalle in kurzer Zeit schmelzen und vermeiden Sie Schäden an den Zellen aufgrund des langsamen Schmelzens, das dazu führt, dass Wasser in die Zellen eindringt und eine intrazelluläre Rekristallisation bildet. Die verwendeten Zellkulturflaschen und anderen Verbrauchsmaterialien sollten aseptisch sein.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.