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Ein cell factory ist eine ein- oder mehrschichtige Struktur von Zellkultur-Verbrauchsmaterialien. Während des Zellkulturprozesses müssen wir den Wachstumszustand der Zellen rechtzeitig erfassen, bevor wir mit dem nächsten Schritt fortfahren. Die Anzahl lebensfähiger Zellen kann durch Trypanblau-Färbung nachgewiesen werden. Die spezifische Betriebsmethode ist wie folgt:
1. Bei adhärenten Zellen das Medium absaugen, die Verdauungslösung zugeben und für eine angemessene Zeit im Inkubator verdauen. Nachdem die Zellen rund geworden waren, wurde der Verdau durch Zugabe eines gleichen oder größeren Volumens an Medium als das Volumen des Verdauungsprodukts beendet. Nach der Zentrifugation wird die Zellsuspension mit Kulturmedium hergestellt;
2. Nehmen Sie 0,5 ml Trypanblau-Lösung, 0,3 ml PBS und 0,2 ml Zellsuspension und mischen Sie gut. Dann wurde die Mischung für 1-2 min stehengelassen. Verwenden Sie eine Kapillarpipette oder eine kleine 10-ul-Pipettenspitze, um eine kleine Menge der Mischung zu entnehmen und in das Hämozytometer zu injizieren;
3. Zählen Sie mindestens 1000 Zellen und zählen Sie die Anzahl der gefärbten Zellen;
4. Waschen Sie die Zählplatte und das Deckglas mit Reinstwasser und 75 % Ethanol;
5. Normale Zellen werden nicht gefärbt, erst nachdem die Zellen abgestorben sind, wird die Permeabilität der Zellmembran größer, Trypanblau dringt in die Zellen ein und die Zellen erscheinen blau. Die Mischung sollte nicht zu lange gelagert werden, da sonst auch die normalen lebenden Zellen den Farbstoff aufnehmen, was die Zählgenauigkeit beeinträchtigt;
6. Zelllebensfähigkeit (%) = (Gesamtzahl der Zellen – Zahl der gefärbten Zellen)/Gesamtzahl der Zellen*100;
7. Wie das Zellzählverfahren hat auch die Trypanblau-Färbung einen großen Fehler. Es kann nur das frühe Apoptoseniveau erkennen und kann den Unterschied zwischen der Kontrollgruppe und der Versuchsgruppe nicht zeigen.
Beim Kultivieren von Zellen in einer Zellfabrik gibt es immer einige Zellen, die aus verschiedenen Gründen sterben. Die Beherrschung der Anzahl lebender Zellen und der Zelllebensfähigkeit ist eine Schlüsseloperation bei Zellkulturexperimenten und ein effektiver Weg, um den Fortschritt des Experiments sicherzustellen.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.