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Die Zellkultur umfasst die Zellinokulation, Kultivierung, Ernte und andere Prozesse. Die Zellen im Zellkulturflaschen sind bis zu einem gewissen Grad gewachsen und müssen geerntet werden. Zu diesem Zeitpunkt müssen die Zellen an der Kolbenwand mit Trypsin verdaut und dann geerntet werden. Bei der Verwendung von Pankreatin muss die Verdauungszeit kontrolliert werden.
Trypsin ist eine heterogene Protease, die das Protein auf der Zellmembran und den Zellkulturflaschen abbauen kann. Durch den Abbau des Proteins an einer bestimmten Stelle wird das Protein an der Verbindungsstelle zwischen den Proteinen abgebaut und die Zellen werden aufgrund der Spannung ihres inneren Zytoskeletts kugelförmig, wodurch die Zellen getrennt werden. Der Grad der Trypsinverdauung ist ein entscheidender Schritt in der Zellkultur: Übermäßig verdaute Zelltrümmer nehmen zu, schwarzer Schaum nimmt zu, Zellen fallen in Stücke, was die Lebensfähigkeit der Zellen ernsthaft beeinträchtigt, und einige Zellen schwimmen und verlieren mit dem verworfenen Trypsin; Verdauung Unzureichend, Zellen lassen sich nur schwer von der Flaschenwand herunterblasen, wiederholtes Pipettieren wird auch die Lebensfähigkeit der Zellen beeinträchtigen.
Unterschiedliche Gewebe oder Zellen reagieren unterschiedlich auf die Wirkung von Pankreatin. Die Aktivität von dispergierten Pankreatinzellen hängt auch von ihrer Konzentration, Temperatur und Wirkungszeit ab. Bei einem pH-Wert von 8,0 und einer Temperatur von 37 ist die Wirkungsfähigkeit der Pankreatinlösung relativ stark. Bei der Anwendung von Pankreatin sollten Konzentration, Temperatur und Zeit kontrolliert werden, um Zellschäden durch Überverdauung zu vermeiden. Da Ca2+, Mg2+, Serum und Protein die Aktivität von Pankreatin reduzieren können, sollte BSS ohne Ca2+ und Mg2+ verwendet werden, wenn eine Pankreatinlösung, wie z. B. D-Hanks-Lösung, zubereitet wird. Wenn Sie die Verdauung beenden, verwenden Sie ein serumhaltiges Kulturmedium oder einen Trypsin-Inhibitor, um die Wirkung von Pankreatin auf die Zellen zu stoppen.
Außerdem können Sie bei einer neu gekauften Zelle zuerst eine niedrige Trypsinkonzentration verwenden, um die Verdauung herauszufinden Zeit, und beobachten Sie jede Minute, ob die Zellen rund sind, und machen Sie ein Protokoll. Kurz gesagt, beim Ernten der Zellen in den Zellkulturflaschen muss die Trypsin-Verdauungszeit kontrolliert werden, um die Lebensfähigkeit der Zellen aufrechtzuerhalten.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.