Produktion von Hepatitis-C-Viren mit hohem Titer in einem skalierbaren Einweg-Bioreaktor mit hoher Zelldichte

Thu May 19 09:28:56 CST 2022

2. Materialien und Methoden

2.1. Aufrechterhaltung von Huh7.5-Zellen

Huh7.5-Zellkulturen wurden in Zellkultur-T-Flaschen in serumhaltigem Medium (SCM) gehalten: Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) (Gibco, Paisley, UK), enthaltend 4 mM GlutaMAX und ergänzt mit 10 % fötales Rinderserum (Sigma, St. Louis, MO, USA), 100 U/ml Penicillin und 100 µg/ml Streptomycin (Sigma). In T175-Flaschen (Nunc, Roskilde, Dänemark) und dreischichtigen Kulturflaschen (Nunc) wurden Huh7.5-Zellen alle 2–3 Tage passagiert. Alle Zellkulturen wurden bei 37 °C und 5 % CO2 gehalten.

2.2. HCV Virus Stocks

Zwei sequenzbestätigte Stocks des rekombinanten SA13/JFH1core-NS5B vom Genotyp 5a [28], gezüchtet in Monolayer-Huh7.5-Zellkulturen in T-Flaschen, wurden in dieser Studie verwendet. Eine Virusstammlösung der dritten Passage mit einem Infektiositätstiter von 5,8 log10 FFU/ml, gezüchtet unter serumhaltigen (SC) Bedingungen [39], wurde verwendet, um CelCradle™-Kulturen, Schüttelkolbenkulturen und für Experimente zur Viruscharakterisierung zu inokulieren. Eine Virusstammlösung der vierten Passage mit einem Infektiositätstiter von 5,1 log10 FFU/ml [32], gezüchtet unter SF-Bedingungen [39], wurde für Viruscharakterisierungsexperimente verwendet.

Quelle von: https://www.mdpi .com/2076-393X/10/2/249/htm

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.