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Mycoplasma-Kontamination ist ein sehr häufiges Problem bei der Kultivierung von Zellen in Zellfabriken. Im Gegensatz zu anderen Kontaminationen trüben mycoplasma-kontaminierte Zellen in der Regel nicht ein, sodass eine Beurteilung mit bloßem Auge schwierig ist. Es gibt vier Möglichkeiten, festzustellen, ob Zellen mit Mykoplasmen kontaminiert sind:
1. DNA-Fluoreszenzfärbung
Die Methode der DNA-Fluoreszenzfärbung basiert auf dem Prinzip, dass der Fluoreszenzfarbstoff Hoechst33258 an die basenreiche AT-Region in der DNA von Mykoplasmen binden kann. Fluoreszierende Punkte sind Mycoplasma-DNA, die reich an AT-Basenregionen ist.
2. PCR-Technologie
Die spezifischen Primer werden gemäß den konservierten Sequenzen im Mycoplasma-Genom entworfen, die Nukleinsäure der zu testenden Probe wird amplifiziert, und die Diagnose wird durch Analyse der Größe des amplifizierten Produkts gestellt. Die PCR-Nachweistechnologie wird zum Nachweis einer Mykoplasmenkontamination mit kurzem Zyklus, hoher Empfindlichkeit, guter Spezifität und einfacher Bedienung verwendet und kann eine große Anzahl von Proben gleichzeitig nachweisen.
3. Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA)
ELISA wird zum Nachweis einer Mykoplasmenkontamination mit guter Spezifität und Empfindlichkeit verwendet und kann den Nachweis einer großen Anzahl von Proben gleichzeitig vervollständigen. Es hat die Eigenschaften eines einfachen, schnellen und quantitativen qualitativen Nachweises.
4. Elektronenmikroskop
In der Regel werden Zellen in Zellfabriken 48 bis 72 Stunden kultiviert. Bevor die Zellen nahezu konfluent sind, werden die Zellen mit Trypsin verdaut, um eine Zellsuspension herzustellen, die vor der Beobachtung fixiert, eingebettet und in Scheiben geschnitten wird.
Die oben genannten vier häufig verwendeten Nachweismethoden beim Nachweis einer Mykoplasmenkontamination in Zellfabriken. Gegenwärtig sind mehr als 20 Arten von Mykoplasmen dafür bekannt, Zellen zu kontaminieren, von denen mehr als 95 % orale Mykoplasmen sind, daher sollten Bediener bei der Kultivierung von Zellen auf einen aseptischen Betrieb achten.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.