English
Cellekultur er en meget vanskelig opgave, og enhver uagtsomhed i de små detaljer i operationen kan føre til, at eksperimentet mislykkes. Cellekulturflasker er en type kulturbeholdere, der ofte bruges, så hvad er den grundlæggende proces?
Vær først og fremmest opmærksom på sterilitet. Uanset hvilket rør med væske, så prøv at lukke låget så hurtigt som muligt efter åbning, og sæt låget opad. Gå ikke hen over åbne beholdere under håndtering. Derudover er det bedst at placere alle slags ting på det sterile bord i en linje, parallelt med dig selv. Prøv ikke at overlappe front mod bagside.
Alle forbrugsreagenser, der bruges til cellemanipulation, er fortrinsvis cellekulturspecifikke. Generelt er de fleste af dem engangsforbrugsvarer.
(1) Cellerstatning:
Fjern det originale dyrkningsmedium fra dyrkningsskålen/-flasken med en pipette eller en pipette, og tilsæt nyt dyrkningsmedium.
FuDau T75 Cellekulturflasker
(2) Cellepassage:
Før passage, observer om cellerne er tætte, og om de begynder at smelte sammen. Generelt, når fusionen når 70-80%, kan den passeres. Det kan også videregives tidligere.
I tilfælde af klæbende celler:
1) Fjern den originale kulturopløsning fra petriskålen/flasken med en pipettespids eller en pipette;
2) Vask med steril PBS eller sterilt saltvand i 3 gange (i henhold til dyrkningsvolumenet);
3) Tilsæt en passende mængde trypsin for at fordøje i en passende tid (generelt 0,25 % trypsin; 9 cm/10 cm dyrkningsskål og 25 cm dyrkningsflaske, tilsæt 1 ml trypsin ad gangen. Fordøjelsestiden afhænger af celletypen og andre forhold. Generelt, hvis det er en cellelinje, er ikke-primær kultur, fordøjelse i 1-2 minutter nok);
4) Pipetter dusinvis af gange med spidsen af pipetten (afhængigt af celletypen. Generelt er cellelinjen 30-50 gange, og det tager normalt ca. 2 minutter);
5) Tilsæt en passende mængde komplet medium for at stoppe trypsinisering (hvis det er en 9cm/10cm kulturskål og en 25cm kulturflaske, du kan tilføje 1mL komplet medium; nu er der 2mL opløsning i kulturflasken (skålen)).
6 ) Opløsningen kan nu deles i hætteglas (2mL). Hvis det er en cellelinje, opdeles den direkte i to dyrkningsflasker (skåle). I tilfælde af primær kultur kan cellerne adskilles i henhold til fordøjelsestiden; derfor kan opløsningen (2mL) overføres til en ny dyrkningskolbe (skål).
FuDau T225 cellekulturflasker
7) Suppler to dyrkningsflasker (skåle) med komplet dyrkningsmedium til normalt volumen (hvis det er en 9 cm/10 cm dyrkningsskål og en 25 cm dyrkningsflaske, det er 5mL komplet dyrkningsmedium)
8) Observer under mikroskop. De celler, der lige er blevet passeret, har ikke klæbet til væggen, er suspenderet i opløsningen og er runde. Generelt vil det klæbe til væggen inden for 2 timer. Hvis det allerede har klæbet til væggen, vil det have forskellige former alt efter celletypen, men normalt er det ikke rundt.
9) Når observationen under mikroskopet er korrekt, lægges den i cellekulturinkubatoren. Før du sætter kulturflasken (skålen) i den, kan du tørre den af med desinficerende alkohol.
10) Efter subkultur er det bedst at skifte cellemediet én gang næste dag. Det kan selvfølgelig også afhænge af situationen.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.