English
Y plât diwylliant cellyn fath o offeryn biolegol. Fe'i rhennir yn waelod gwastad a gwaelod crwn yn ôl y siâp. Mae nifer y ffynhonnau yn cynnwys 6 ffynhonnau, 12 ffynhonnau, 24 ffynhonnau, 48 wells, 96 ffynhonnau, 384 ffynhonnau, ac ati Fe'i defnyddir yn bennaf ar gyfer diwylliant celloedd a gellir ei ddefnyddio hefyd ar gyfer mesur crynodiad protein, defnyddir platiau 96-ffynnon yn gyffredin ar gyfer canfod MTT. Yr egwyddor ganfod yw y gall y dehydrogenase succinate ym mitocondria celloedd byw leihau'r MTT alldarddol i formazan grisial glas-porffor anhydawdd dŵr (Formazan) a'i adneuo yn y celloedd, tra nad oes gan gelloedd marw unrhyw swyddogaeth o'r fath. Gall Dimethyl sulfoxide (DMSO) hydoddi formazan mewn celloedd, a mesurir ei werth amsugno golau ar 570nm gyda immunoassay sy'n gysylltiedig ag ensymau, a all adlewyrchu'n anuniongyrchol nifer y celloedd byw. O fewn ystod benodol o rifau celloedd, mae faint o ffurfiad grisial MTT yn gymesur â nifer y celloedd. Mae'r camau canfod fel a ganlyn:
1. Diwylliwch y celloedd mewn
. Ar ôl i ddwysedd y gell fod yn briodol, ychwanegwch 50ul MTT at bob ffynnon a pharhau i feithrin am 4 awr;
96-well plât diwylliant celloedd Sudwch y cyfrwng diwylliant sy'n cynnwys MTT i ffwrdd ac ychwanegwch 150ul o DMSO. Dirgrynwch yn llorweddol am 10 munud i doddi'r crisialau yn llawn. Ar gyfer celloedd crog, ar ôl centrifugation, 2.
suck away
y cyfrwng, ac yna ychwanegu DMSO i ddiddymu;3. Mesurwch yr amsugnedd ar 550nm ar yr offeryn imiwno-assay sy'n gysylltiedig ag ensymau (gosodwch grŵp rheoli rhesymol a grŵp gwag); 4. Cyfradd goroesi celloedd = gwerth amsugniad grŵp arbrofol / gwerth amsugno'r grŵp rheoli * 100%
Dylid nodi yn ystod y llawdriniaeth bod MTT yn garsinogenig. Os yn bosibl, ceisiwch wisgo'r math o fenig ffilm dryloyw. Mae angen i'r MTT a baratowyd fod yn ddi-haint. Mae MTT yn sensitif iawn i facteria. Nid oes ots a ydych chi'n ychwanegu at y plât diwylliant celloedd 96-ffynnon heb ei amddiffyn rhag golau. , Wedi'r cyfan, mae'r amser yn fyr, neu gallwch chi ddiffodd y goleuadau ar y consol.
4. Cell survival rate=absorbance value of experimental group/absorbance value of control group*100%.
It should be noted during the operation that MTT is carcinogenic. If possible, try to wear the kind of transparent film gloves. The prepared MTT needs to be sterile. MTT is very sensitive to bacteria. It does not matter if you add to the 96-well cell culture plate without protecting it from light. , After all, the time is short, or you can turn off the lighting on the console.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.