English
Mae bacteria lysogenig yn cyfeirio at facteria sydd â phrophages wedi'u hintegreiddio ar eu cromosomau ac sy'n gallu tyfu ac atgynhyrchu'n normal heb gael eu lysed. Mae bacterioffagau ysgafn wedi'u defnyddio'n helaeth ym meysydd trawsgludiad, fectorau peirianneg enetig, a bioleg moleciwlaidd. Gellir defnyddio'r fflasg diwylliant cell i wirio lysogenedd bacteria. Mae'r dull gweithredu penodol fel a ganlyn:
1. Diwylliant bacteria lysogenig: Brechu E. coli 225 (λ) wedi'i actifadu gan y llethr LB i mewn i fflasg meithrin celloedd 250ml sy'n cynnwys hydoddiant meithrin LB 20ml, diwylliant gydag ysgwyd ar 30 ° C am 16 awr, ac yna cymryd ataliad bacteriol 2ml ohono a ei gysylltu ag un arall Mewn fflasg Erlenmeyer 250ml sy'n cynnwys 20ml o broth LB, meithriniad gydag ysgwyd ar 37°C am 2 awr i'r cyfnod logarithmig.
2. Eithrio phage rhad ac am ddim: Os Bacillus yw'r straen i'w brofi, gellir ei wneud yn ataliad sbôr, ac yna ei drin ar 80 ° C am 10 munud i ladd y ffage a all gael ei arsugniad ac yn rhydd ar wyneb y bacteria lysogenig; os nad yw'r straen sydd i'w brofi yn Bacillus , Defnyddiwch antiserum a baratowyd gan phage neu hydoddiant citrad sodiwm 0.2% i olchi celloedd lysogen cyfnod log i gael gwared â phage sydd wedi'i arsugnu ar yr wyneb ac am ddim. Ar ôl centrifugio ar 4000r/min am 10 munud, gellir ychwanegu'r uwchnatydd gyda bacteria dangosydd sensitif ar gyfer pennu plât haen dwbl, a ddefnyddir i brofi gwedd rhydd y sampl a'r phage sy'n arsugniad y bacteria lysogenig. Y ffag ar ôl allgyrchiad Mae'r celloedd yn cael eu hysgogi.
3. Anwytho bacteria lysogenig: mae'r bacteria a gesglir ar ôl centrifugation yn cael eu golchi ddwywaith â halwynog normal di-haint, a'u gwneud yn grynodiad terfynol o 1011 o gelloedd/ml gyda halwynog arferol neu glustog Tris-HCL 100mmol/l (pH7.0) Ar gyfer ataliad bacteriol, ychwanegwch 5ml o ataliad bacteriol i bob dysgl, arbelydru gyda lamp UV 30W ar bellter o 30cm am 30au, ar unwaith ychwanegu 5ml o hydoddiant meithrin LB crynodiad dwbl, cymysgwch yn dda a deorwch yn y tywyllwch ar 37 ° C am 2h.
4. Arolygu straen lysogenig: Gweithredwch yn ôl y dull agar haen ddwbl, ychwanegwch ychydig ddiferion o glorofform i'r lysate anwythol uchod, a'i wanhau'n briodol gyda'r dull gwanhau 10-plyg. Ar ôl dewis y tri gwanhad o'r gwanediad, cymerwch 0.3ml ar gyfer pob gwanhad. Cymysgwch yn dda gyda 0.2ml o ataliad bacteria E. coli 226 sy'n sensitif i gyfnod logarithmig, yna ychwanegwch gyfrwng hanner corff LB sydd wedi'i doddi a'i oeri i 45°C, ei gymysgu ar unwaith, ac yna ei arllwys ar blât cyfrwng solet LB. Ar ôl solidification, 37 Deor ar ℃ am 6h ac arsylwi. Os bydd nifer fawr o blaciau yn ymddangos ar y plât diwylliedig, mae'n profi bod y straen a brofwyd yn lysogen.
I wirio a oes gan y bacteria lysogenicity, dilynwch y camau uchod. Rhowch sylw i sterility y broses yn ystod gweithrediad er mwyn osgoi gweithrediad amhriodol sy'n effeithio ar y canlyniadau prawf.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.