বিভিন্ন কোষের সংস্কৃতি করার সময়, সেল কালচার ফ্লাস্ক হল এক ধরনের কোষ সংস্কৃতির ভোগ্য সামগ্রী যা বেশি ঘন ঘন ব্যবহার করা হয়। এগুলি বেশিরভাগ অনুগত কোষের সংস্কৃতির জন্য ব্যবহৃত হয় এবং নির্দিষ্টকরণ 25ml থেকে 225ml পর্যন্ত। হ্যামস্টার কিডনি সেল কালচার মাধ্যম এই ব্যবহারযোগ্য ব্যবহার করবে, এবং এর সংস্কৃতির নির্দিষ্ট ধাপগুলি নিম্নরূপ:
1। কোষ সংস্কৃতির জন্য প্রস্তুতিমূলক কাজ:
1) MEM মাধ্যম প্রস্তুত করুন; উচ্চ-মানের ভ্রূণের বোভাইন সিরাম, 10%; ডাবল অ্যান্টিবডি 1%।
2) সংস্কৃতির অবস্থা: গ্যাস ফেজ: বায়ু, 95%; কার্বন ডাই অক্সাইড, 5%। তাপমাত্রা: 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস, ইনকিউবেটরের আর্দ্রতা 70%-80%।
3) হিমায়িত সমাধান: 90% সিরাম, 10% DMSO, ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত।
2। কোষ প্রক্রিয়াকরণ:
1) ক্রায়োপ্রিজারভড কোষ পুনরুদ্ধার: একটি 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস জলের স্নানে 1 মিলি সেল সাসপেনশন ধারণকারী ক্রায়োপ্রিজারভড টিউবটিকে দ্রুত ঝাঁকান এবং গলা দিন, এটি একটি সেন্ট্রিফিউজ টিউবে যোগ করুন যাতে 4-6 মিলি সম্পূর্ণ মাঝারি থাকে এবং মিশ্রিত হয়। আমরা হব. 3-5 মিনিটের জন্য 1000RPM-এ সেন্ট্রিফিউজ করুন, সুপারনাট্যান্ট বাদ দিন এবং সম্পূর্ণ মাঝারি মধ্যে কোষগুলিকে পুনরায় চালু করুন। তারপরে সেল সাসপেনশনটি একটি সেল কালচার ফ্লাস্কে যোগ করা হয় যাতে 6-8 মিলি সম্পূর্ণ মাঝারি থাকে এবং রাতারাতি 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে কালচার করা হয়। পরের দিন একটি মাইক্রোস্কোপের নীচে কোষের বৃদ্ধি এবং কোষের ঘনত্ব পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল।
2) কোষের উত্তরণ: কোষের ঘনত্ব 80%-90% এ পৌঁছালে, এটি উপসংস্কৃতি করা যেতে পারে। কোষে, পরবর্তী পরীক্ষা-নিরীক্ষার জন্য কালচারের প্রথম ৩টি প্যাসেজে কোষের বীজের একটি ব্যাচ হিমায়িত করার পরামর্শ দেওয়া হয়। উপরন্তু, যখন কোষগুলিকে ক্রায়োপ্রিজারভেশন করা হয়, তখন কোষের উত্তরণের প্রক্রিয়া অনুসারে পরিপাক কোষগুলিকে একটি সেন্ট্রিফিউজ টিউবে সংগ্রহ করুন এবং কোষের ক্রায়োপ্রিজারভেশন ঘনত্ব নির্ধারণ করতে হিমোসাইটোমিটার ব্যবহার করুন। সাধারণ কোষের প্রস্তাবিত হিমায়িত ঘনত্ব হল 1×106~1×107 কার্যকরী কোষ/ml।
3) Cryopreservation of cells: After receiving the cells, it is recommended to freeze a batch of cell seeds in the first 3 passages of culture for subsequent experiments.
The above are the specific steps for culturing hamster kidney cells in cell culture flasks. In addition, when cells are cryopreserved, collect the digested cells into a centrifuge tube according to the process of cell passage, and use a hemocytometer to count them to determine the cryopreservation density of cells. The recommended freezing density of general cells is 1×106~1×107 viable cells/ml.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.