সেল কালচার ফ্লাস্কে কোষগুলিকে কীভাবে উত্তরণ করা যায়

উপসংস্কৃতি বলতে সংস্কৃতিকে ছোট ছোট অংশে বিভক্ত করার প্রক্রিয়াকে বোঝায়, সেগুলিকে অন্য সংস্কৃতির পাত্রে (বোতল) পুনঃ-ইনোকুলেট করা এবং তারপরে সংস্কৃতি। সেল কালচার ফ্লাস্ক কোষ চাষ করার সময় সাধারণত ব্যবহৃত হয়। সুতরাং, ফ্লাস্কের কোষগুলিকে কীভাবে উপসংস্কৃতি করা যায়?

সাধারণত, সেল কালচার ফ্লাস্কের কোষগুলি একটি ঘন মনোলেয়ারে বৃদ্ধি পায় এবং মূলত স্যাচুরেটেড হয়। কোষগুলিকে পুনরুত্পাদন এবং কোষের সংখ্যা প্রসারিত করা চালিয়ে যেতে সক্ষম করার জন্য, প্যাসেজ অপারেশনগুলি চালানো প্রয়োজন। স্থগিত কোষগুলিকে সরাসরি আলাদা করা যায়, যখন অনুগামী কোষগুলিকে আলাদা করার আগে হজম করা প্রয়োজন। সাধারণত, প্রোটিওলাইটিক এনজাইমগুলি (যেমন ট্রিপসিন) অনুগত কোষগুলিকে একক কোষে হজম করতে ব্যবহৃত হয়। ইথাইলেনেডিয়ামিনেটেট্রাসেটিক অ্যাসিড (ইডিটিএ) হজমের উন্নতির জন্যও যোগ করা যেতে পারে। কোষগুলি গোলাকার না হওয়া পর্যন্ত এবং বোতলের প্রাচীর থেকে বিচ্ছিন্ন না হওয়া পর্যন্ত কোষগুলি পর্যবেক্ষণ করুন। এই প্রক্রিয়া প্রায়ই 5-15 মিনিট সময় লাগে। কোষের খণ্ড এড়াতে, কোষগুলিকে হজম করার প্রক্রিয়া চলাকালীন সেল কালচার ফ্লাস্কগুলিতে টোকা দেবেন না৷

বিশেষ করে হজম করা কঠিন কোষগুলির জন্য, আপনি ট্রিপসিন ইডিটিএ হজম সমাধান যোগ করতে পারেন এবং কোষগুলিকে 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে রাখতে পারেন হজম সহজতর। কোষগুলি বোতলের প্রাচীর থেকে আলাদা হওয়ার পরে, অবিলম্বে হজম বন্ধ করতে সিরাম ধারণকারী একটি সম্পূর্ণ মাধ্যম যোগ করুন। সিরামের কিছু প্রোটিন অগ্ন্যাশয়কে বাধা দিতে পারে। এনজাইম কার্যকলাপ। সাধারণভাবে, সেন্ট্রিফিউগেশন প্রয়োজন হয় না। যদি কোষের সিরাম-মুক্ত বা নিম্ন-সিরাম মাধ্যম প্রয়োজন হয়, 5 মিনিটের জন্য 125000g এ সেন্ট্রিফিউজ করুন, তারপর বন্ধ করা মাধ্যমটি বাদ দিন, উপযুক্ত নতুন মাধ্যম যোগ করুন এবং উপ-সংস্কৃতির আগে কোষগুলিকে আলতো করে মিশ্রিত করুন। -1:20, কোষের প্রকারের উপর নির্ভর করে। উত্তরণ প্রক্রিয়ায়, ট্রিপসিন কিছু কোষের কোষের ঝিল্লির ক্ষতি করবে। আপনি কোষগুলিকে আলতো করে স্ক্র্যাপ করতে একটি সেল স্ক্র্যাপার ব্যবহার করতে পারেন, একটি উপযুক্ত পরিমাণ মাঝারি যোগ করতে পারেন, কোষগুলিকে মেশানোর জন্য আলতো করে পাইপেট দিতে পারেন এবং সেগুলিকে একটি নতুন কালচার ফ্লাস্কে স্থানান্তর করতে পারেন।

The cell passaging ratio is generally 1:2-1:20, depending on the cell type. In the process of passaging, trypsin will damage the cell membrane of some cells. You can use a cell scraper to gently scrape the cells, add an appropriate amount of medium, gently pipette to mix the cells, and transfer them to a new culture flask.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.