সেল লাইসিস পরীক্ষায় সেল কালচার ফ্লাস্কের প্রয়োগ

কোষের ব্যাপ্তিযোগ্যতা এবং কার্যকলাপ পরিবর্তন করার জন্য সেল লাইসিস একটি গুরুত্বপূর্ণ পরীক্ষামূলক পদ্ধতি। এর মানে হল যে একটি কোষ একটি ভাইরাস দ্বারা সংক্রামিত হওয়ার পরে, ভাইরাসটি হোস্ট কোষের পুষ্টিগুলি ব্যবহার করে তার নিজের বংশকে সংশ্লেষিত করে এবং তারপরে ভাইরাসের বংশধর হোস্ট কোষকে ধ্বংস করে এবং কোষের বাইরে ছেড়ে দেওয়া হয়। সেল লাইসিস পরীক্ষায়, সেল কালচার ফ্লাস্ক একটি সাধারণ ভোগযোগ্য। সেল লাইসিসের ধাপগুলো নিম্নরূপ:

1। কালচার মিডিয়ামটি ঢেলে দিন এবং সেল কালচার বোতলটিকে শোষক কাগজে উল্টে দিন যাতে শোষক কাগজটি কালচার মিডিয়ামকে শোষণ করে নেয় (অথবা অবশিষ্ট কালচার মাধ্যমটি বোতলের নীচে প্রবাহিত হতে দেওয়ার জন্য বোতলটিকে কিছুক্ষণের জন্য সোজা করে রাখুন। এবং তারপর এটি চুষতে একটি পাইপেট ব্যবহার করুন)

2. কোষের প্রতিটি বোতলে 4℃ প্রি-কুলড PBS (0.01M pH7.2～7.3) এর 3ml যোগ করুন। কোষগুলিকে সমতল রাখুন এবং কোষগুলি ধোয়ার জন্য 1 মিনিটের জন্য আলতোভাবে ঝাঁকান এবং তারপরে ধোয়ার দ্রবণটি ফেলে দিন। উপরের অপারেশনটি দুবার পুনরাবৃত্তি করুন, কোষগুলিকে তিনবার ধুয়ে কালচার তরল ধুয়ে ফেলুন। PBS বর্জন করুন এবং বরফের উপর কালচার ফ্লাস্ক রাখুন।

3. 1ml lysis বাফারে 10ul PMSF (100mM) যোগ করুন, ভালভাবে ঝাঁকান এবং বরফের উপর রাখুন। (লিসিস দ্রবণের সাথে মিশ্রিত করার আগে কোন স্ফটিক না হওয়া পর্যন্ত PMSF অবশ্যই নাড়াতে হবে।)

4. কোষের প্রতিটি ফ্লাস্কে PMSF ধারণকারী 400ul লাইসিস বাফার যোগ করুন এবং 30 মিনিটের জন্য বরফের উপর লাইস করুন। কোষগুলিকে সম্পূর্ণরূপে লাইজ করার জন্য, ফ্লাস্কটি ঘন ঘন নাড়াতে হবে।

5. লাইসিস করার পরে, কালচার ফ্লাস্কের একপাশে কোষগুলিকে স্ক্র্যাপ করার জন্য একটি পরিষ্কার স্ক্র্যাপার ব্যবহার করুন (ক্রিয়াটি দ্রুত হওয়া উচিত), এবং তারপর কোষের ধ্বংসাবশেষ এবং লাইসেটকে 1.5 মিলি সেন্ট্রিফিউজ টিউবে সরানোর জন্য একটি বন্দুক ব্যবহার করুন। (সম্পূর্ণ অপারেশনটি যতটা সম্ভব বরফের উপর করা উচিত।)

6. 12000 rpm-এ 5 মিনিটের জন্য 4°C এ সেন্ট্রিফিউজ। (প্রি-কুল করার জন্য আগাম সেন্ট্রিফিউজ চালু করুন)

7। 0.5 মিনিটের জন্য একটি সেন্ট্রিফিউজ টিউবে সেন্ট্রিফিউজড সুপারনাট্যান্ট স্থানান্তর করুন এবং এটিকে -20°C এ সংরক্ষণ করুন। , HEK 293 কোষ, CAR-T কোষ, CHO কোষ, পোকা কোষ, ইত্যাদি।

Cell culture flasks সেল কালচার ফ্লাস্ক

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.