Як пасаваць клеткі ў колбах для культуры клетак

Wed May 18 14:38:40 CST 2022

Субкультура адносіцца да працэсу падзелу культуры на дробныя часткі, перасялення іх у іншую пасудзіну для культуры (бутэльку), а затым культывавання. Клеточные культуры звычайна выкарыстоўваюцца расходныя матэрыялы пры культываванні клетак. Такім чынам, як пасеяць клеткі ў колбе?

Як правіла, клеткі ў колбах для культуры клетак вырастаюць у шчыльны монаслой і ў асноўным насычаюцца. Для таго каб клеткі працягвалі размнажацца і пашыраць колькасць клетак, неабходна праводзіць аперацыі па праходжанні. Падвешаныя клеткі могуць быць аддзеленыя непасрэдна, у той час як адгезійныя клеткі павінны быць перавараны, перш чым яны могуць быць падзеленыя. Як правіла, пратэялітычныя ферменты (напрыклад, трыпсінаў) выкарыстоўваюцца для пераварвання адгезійных клетак у асобныя клеткі. Для паляпшэння стрававання можна таксама дадаць этылендыямінтэтравоцатную кіслату (ЭДТА). Назірайце за клеткамі, пакуль клеткі не стануць круглымі і не адлучацца ад сценкі бутэлькі. Гэты працэс часта займае 5-15 хвілін. Каб пазбегнуць згусткаў клетак, не стукайце па колбах для культуры клетак падчас працэсу пераварвання клетак.

How to passage the cells in the cell culture flasks

Для асабліва цяжкіх для пераварвання клетак вы можаце дадаць раствор трыпсіну EDTA і змясціць клеткі пры тэмпературы 37°C, каб палегчыць страваванне. Пасля аддзялення клетак ад сценкі бутэлькі неадкладна дадайце поўную сераду, якая змяшчае сыроватку, каб спыніць страваванне. Некаторыя вавёркі ў сыроватцы могуць інгібіраваць працу падстраўнікавай залозы. Актыўнасць ферментаў. Увогуле, цэнтрыфугаваць не трэба. Калі для клетак патрабуецца асяроддзе без сыроваткі або з нізкім утрыманнем сыроваткі, цэнтрыфугуйце пры 125000g на працягу 5 хвілін, затым выкіньце асяроддзе, якое спыняецца, дадайце адпаведную новую асяроддзе і асцярожна змяшайце клеткі перад субкультурай.

Каэфіцыент пасажу клетак звычайна складае 1:2 -1:20, у залежнасці ад тыпу клеткі. У працэсе пасажирования трыпсін пашкодзіць клеткавую мембрану некаторых клетак. Вы можаце выкарыстоўваць скрабок для клетак, каб акуратна саскрабаць клеткі, дадаць адпаведную колькасць асяроддзя, акуратна піпеткай змяшаць клеткі і перанесці іх у новую культуральную колбу.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.