Прымяненне пласцінкі для культуры клетак у выяўленні МТТ

Wed May 18 14:36:57 CST 2022

Пліта для клетачнай культурыз'яўляецца своеасаблівым біялагічным сродкам. Па форме дзеліцца на плоскае і круглае дно. Колькасць лунак уключае 6 лунак, 12 лунак, 24 лункі, 48 ​​лункі, 96 лунак, 384 лункі і г.д. У асноўным ён выкарыстоўваецца для культуры клетак, а таксама можа быць выкарыстаны для вымярэння канцэнтрацыі бялку, 96-лункавыя пласціны звычайна выкарыстоўваюцца для выяўлення МТТ.

МТТ метад, таксама вядомы як каларыметрычны метад МТТ, з'яўляецца метадам выяўлення выжывання і росту клетак. Прынцып выяўлення заключаецца ў тым, што сукцинатдегидрогеназа ў мітахондрыях жывых клетак можа паменшыць экзагенны МТТ да нерастваральнага ў вадзе сіне-фіялетавага крышталічнага формазана (фармазана) і адкласці яго ў клетках, у той час як мёртвыя клеткі такой функцыі не выконваюць. Дыметилсульфоксид (ДМСО) можа раствараць формазан ў клетках, і яго значэнне паглынання святла вымяраецца пры 570 нм з дапамогай імунаферментнага аналізу, які можа ўскосна адлюстроўваць колькасць жывых клетак. У пэўным дыяпазоне колькасці клетак колькасць крышталяў МТТ прапарцыйна колькасці клетак. Крокі выяўлення наступныя:

1. Культура клетак у 96-лункавы пласціна для культуры клетак. Пасля таго як шчыльнасць клетак будзе адпаведнай, дадайце 50 мкл МТТ у кожную лунку і працягвайце культываваць на працягу 4 гадзін;

2. Высмактаць культуральную сераду, якая змяшчае МТТ, і дадаць 150 мкл ДМСО. Вібраваць гарызантальна на працягу 10 хвілін, каб крышталі цалкам растварыліся. Для падвешаных клетак пасля цэнтрыфугавання адсмоктваюць асяроддзе, а затым дадаюць ДМСО для растварэння;

3. Вымераць паглынанне пры 550 нм на імунаферментным прыборы (усталюйце разумную кантрольную групу і пустую групу);

4. Выжывальнасць клетак = значэнне паглынання эксперыментальнай групы / значэнне паглынання кантрольнай групы * 100%.

Падчас аперацыі варта адзначыць, што МТТ з'яўляецца канцэрагенным. Па магчымасці паспрабуйце надзець пальчаткі з празрыстай плёнкі. Прыгатаваны МТТ павінен быць стэрыльным. МТТ вельмі адчувальны да бактэрый. Не мае значэння, калі вы дадасце ў 96-лункавы пласцін для культуры клетак, не абараняючы яго ад святла. , Бо часу мала, або вы можаце адключыць асвятленне на кансолі.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.