English
Лізіс клетак - важны эксперыментальны метад змены пранікальнасці і актыўнасці клетак. Гэта азначае, што пасля заражэння клеткі вірусам вірус выкарыстоўвае пажыўныя рэчывы з клеткі-гаспадара для сінтэзу ўласнага нашчадкаў, а затым нашчадства віруса разбурае клетку-гаспадара і вызваляецца з клетак. У эксперыментах па лізісу клетак культура клетак колбы з'яўляюцца звычайным расходным матэрыялам. Крокі для лізісу клетак з'яўляюцца наступнымі:
1. Выліце асяроддзе для культывавання і зашпіліце бутэльку для культуры клетак на ўбіраючую паперу ўверх дном, каб папера ўбірала пажыўнае асяроддзе (або пастаўце бутэльку на некаторы час у вертыкальным становішчы, каб рэшткавае культурнае асяроддзе сцякала на дно бутэлькі а затым з дапамогай піпеткі адсмоктвайце яго ).
2. Дадайце 3 мл папярэдне астуджанага пры тэмпературы 4 ℃ PBS (0,01 М pH7,2～7,3) у кожную бутэльку клетак. Пакладзеце клеткі плоска і асцярожна падтрасайце на працягу 1 хвіліны, каб прамыць клеткі, а затым выкіньце раствор для промывки. Паўтарыце вышэйпаказаную аперацыю двойчы, прамыўшы клеткі тры разы, каб змыць культуральную вадкасць. Выкіньце PBS і пастаўце культуральную колбу на лёд.
3. Дадайце 10 мкл PMSF (100 мм) да 1 мл буфера для лізіс, добра ўзбоўтайце і пастаўце на лёд. (PMSF перад змешваннем з лізісным растворам неабходна ўзбоўтаць да знікнення крышталяў.)
4. Дадайце 400 мкл буфера для лізіс, які змяшчае PMSF, у кожную колбу клетак і лізіруйце на лёдзе на працягу 30 хвілін. Для поўнага лізісу клетак колбу неабходна часта падтрасаць.
5. Пасля лізісу з дапамогай чыстага скрабка саскрабіце клеткі з аднаго боку культуральнай колбы (дзеянне павінна быць хуткім), а затым з дапамогай пісталета перамясціце рэшткі клетак і лізату ў цэнтрыфужную прабірку аб'ёмам 1,5 мл. (Уся аперацыя павінна праводзіцца як мага больш на лёдзе.)
6. Цэнтрыфугаваць пры 12000 абаротаў у хвіліну пры 4 ° С на працягу 5 мін. (Загадзя ўключыце цэнтрыфугу для папярэдняга астуджэння)
7. Перанясіце адцэнтрыфугаваны супернатант у цэнтрыфужную прабірку на працягу 0,5 мін і захоўвайце пры -20°C
колбы для культуры клетак выкарыстоўваюцца не толькі для эксперыментаў па лізісу клетак, але і для культуры клетак і тканін сярэдняга маштабу ў лабараторыі, напрыклад, клетак Vero , клеткі HEK 293, клеткі CAR-T, клеткі CHO, клеткі насякомых і г.д.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.