خطوات محددة لتنمية خلايا الكلى الهامستر في قوارير زراعة الخلايا

عند استنبات خلايا مختلفة ، تعد قوارير زراعة الخلايا نوعًا من مستهلكات زراعة الخلايا التي يتم استخدامها بشكل متكرر. يتم استخدامها في الغالب لاستنبات الخلايا الملتصقة ، وتتراوح المواصفات من 25 مل إلى 225 مل. وسيستخدم مستنبت خلية الكلى للهامستر هذا المستهلك ، والخطوات المحددة لاستزراعها هي كما يلي:

1. العمل التحضيري لثقافة الخلايا:

1) إعداد وسيط MEM ؛ مصل بقري جنيني عالي الجودة ، 10٪ ؛ ضعف الجسم المضاد 1٪

2) ظروف الثقافة: طور الغاز: الهواء ، 95٪ ؛ ثاني أكسيد الكربون 5٪. درجة الحرارة: 37 درجة مئوية ، رطوبة الحاضنة 70٪ -80٪.

3) محلول التجميد: 90٪ مصل ، 10٪ DMSO ، جاهز للاستخدام.

2. معالجة الخلايا:

1) استعادة الخلايا المحفوظة بالتبريد: قم بهز سريعًا وذوبان الأنبوب المحمي بالتبريد الذي يحتوي على 1 مل من تعليق الخلية في حمام مائي 37 درجة مئوية ، وأضفه إلى أنبوب الطرد المركزي الذي يحتوي على 4-6 مل من الوسط الكامل وامزج نحن سوف. الطرد المركزي في 1000 دورة في الدقيقة لمدة 3-5 دقيقة ، وتجاهل المادة طافية ، وإعادة تعليق الخلايا في وسط كامل. تمت إضافة معلق الخلية بعد ذلك إلى دورق استنبات الخلية يحتوي على 6-8 مل من وسط كامل وتم تربيته عند 37 درجة مئوية طوال الليل. لوحظ نمو الخلايا وكثافة الخلايا تحت المجهر في اليوم التالي.

2) مرور الخلية: إذا وصلت كثافة الخلية إلى 80٪ -90٪ ، فيمكن زراعتها فرعية.

3) حفظ الخلايا بالتبريد: بعد تلقي الخلايا ، يوصى بتجميد دفعة من بذور الخلايا في المقاطع الثلاثة الأولى من الثقافة لإجراء تجارب لاحقة. بالإضافة إلى ذلك ، عندما يتم حفظ الخلايا بالتبريد ، قم بتجميع الخلايا المهضومة في أنبوب الطرد المركزي وفقًا لعملية مرور الخلية ، واستخدم مقياس الكريات الدموية لعدها لتحديد كثافة الحفظ بالتبريد للخلايا. كثافة التجميد الموصى بها للخلايا العامة هي 1 × 106 ~ 1 × 107 خلية قابلة للحياة / مل.

The above are the specific steps for culturing hamster kidney cells in cell culture flasks. In addition, when cells are cryopreserved, collect the digested cells into a centrifuge tube according to the process of cell passage, and use a hemocytometer to count them to determine the cryopreservation density of cells. The recommended freezing density of general cells is 1×106~1×107 viable cells/ml.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.