كيفية نقل الخلايا المحفوظة بالتبريد إلى قوارير زراعة الخلايا

Wed May 18 17:47:28 CST 2022

الحفظ الخلوي بالتبريد هو تقنية تضع الخلايا في بيئة ذات درجة حرارة منخفضة لتقليل التمثيل الغذائي للخلايا للتخزين طويل الأجل. بالإضافة إلى حماية الخلايا ، غالبًا ما تُستخدم هذه التقنية لشراء خلايا معينة وإهدائها وتبادلها ونقلها. لذا ، كيف يمكننا نقل الخلايا المحفوظة بالتبريد إلى قوارير زراعة الخلايا ؟

تحتاج الخلايا المجمدة إلى الإنعاش قبل إجراء العملية التالية. يجب أن يكون إنعاش الخلايا سريعًا ، بحيث يمكن الحفاظ على قابلية الخلايا للحياة بشكل جيد. يمكن تنفيذ العملية على النحو التالي:

1. بعد استلام الخلايا ، تحقق مما إذا كانت العبوة الخارجية كاملة ؛ افتح العبوة الخارجية وأخرج الخلايا المخزنة في الثلج الجاف ؛

2. تحقق مما إذا كان أنبوب الحفظ بالتبريد تالفًا ، وما إذا كانت المحتويات ذائبة ، ثم ضع أنبوب الحفظ بالتبريد الذي تمت إزالته بسرعة في حمام مائي 37 درجة ليذوب ؛

3. يتم تطهير أنبوب الحفظ بالتبريد بنسبة 75٪ كحول ويوضع في خزانة أمان بيولوجي ؛

4. أضف 5 مل وسط كامل إلى أنبوب طرد مركزي 15 مل للاستخدام ؛

5 أضف تعليق الخلية في أنبوب الحفظ بالتبريد إلى الوسط المحضر واخلطه برفق ؛

How to transfer cryopreserved cells to cell culture flasks

6. ضع أنبوب الطرد المركزي سعة 15 مل في جهاز الطرد المركزي وجهاز الطرد المركزي عند 1000 دورة في الدقيقة / دقيقة (حوالي 200 جرام) لمدة 3-5 دقائق ؛

7. إضافة 5 مل وسط كامل إلى قارورة ثقافة الخلية 25 مل للاستخدام ؛

8. أخرج الخلايا التي تم طردها وعقمها بالكحول وضعها في خزانة آمنة ؛

9. نضح بلطف طاف الخلية بالطرد المركزي ، إضافة 1 مل وسط كامل لإعادة تعليق الخلايا ؛

10. إضافة الخلايا المعلقة إلى قارورة ثقافة الخلية المعدة وتخلط بلطف ؛

11. راقب حالة وكثافة الخلايا الملقحة تحت المجهر ، وضع قارورة الثقافة في حاضنة 37 درجة مئوية للزراعة.

في عملية استعادة الخلية ، يمكن أن يضمن الاندماج السريع أن البلورات خارج الخلية تذوب في فترة قصيرة مع مرور الوقت ، وتجنب تلف الخلايا بسبب الذوبان البطيء الذي يتسبب في اختراق الماء للخلايا لتشكيل إعادة التبلور داخل الخلايا. يجب أن تكون قوارير ثقافة الخلية وغيرها من المواد الاستهلاكية المستخدمة معقمة.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.