كيفية مرور الخلايا في قوارير زراعة الخلايا

تشير الثقافة الفرعية إلى عملية تقسيم الثقافة إلى أجزاء صغيرة ، وإعادة تلقيحها في وعاء استزراع آخر (زجاجة) ، ثم الزراعة. بالنسبة للخلايا التي يصعب هضمها بشكل خاص ، يمكنك إضافة محلول هضم التربسين EDTA ووضع الخلايا عند 37 درجة مئوية إلى تسهيل الهضم. بعد فصل الخلايا عن جدار الزجاجة ، أضف على الفور وسيطًا كاملاً يحتوي على مصل لوقف عملية الهضم. يمكن لبعض البروتينات في المصل أن تثبط عمل البنكرياس. نشاط الانزيم. بشكل عام ، الطرد المركزي ليس ضروريًا. إذا كانت الخلايا تتطلب وسيطًا خالٍ من المصل أو منخفض المصل ، فإن الطرد المركزي عند 125000 جم لمدة 5 دقائق ، ثم تخلص من الوسيط المتوقف ، وأضف وسيطًا جديدًا مناسبًا وامزج الخلايا برفق قبل الثقافة الفرعية. هي مواد استهلاكية شائعة الاستخدام عند زراعة الخلايا. لذا ، كيف يمكن زراعة الخلايا في القارورة؟ من أجل تمكين الخلايا من الاستمرار في التكاثر وتوسيع عدد الخلايا ، من الضروري إجراء عمليات المرور. يمكن فصل الخلايا المعلقة مباشرة ، بينما تحتاج الخلايا الملتصقة إلى أن يتم هضمها قبل أن يتم فصلها. بشكل عام ، تُستخدم الإنزيمات المحللة للبروتين (مثل التربسين) لهضم الخلايا الملتصقة في خلايا مفردة. يمكن أيضًا إضافة حمض إيثيلين أمينيتترا أسيتيك (EDTA) لتحسين الهضم. راقب الخلايا حتى تصبح الخلايا مستديرة وتنفصل عن جدار الزجاجة. تستغرق هذه العملية في الغالب من 5 إلى 15 دقيقة. من أجل تجنب تكتلات الخلايا ، لا تنقر على قوارير زراعة الخلايا أثناء عملية هضم الخلايا.

تكون نسبة مرور الخلية بشكل عام 1: 2 -1: 20 ، حسب نوع الخلية. في عملية المرور ، سوف يتسبب التربسين في إتلاف غشاء الخلية لبعض الخلايا. يمكنك استخدام مكشطة الخلية لكشط الخلايا بلطف وإضافة كمية مناسبة من الوسيط والماصة برفق لخلط الخلايا ونقلها إلى قارورة ثقافة جديدة.

For particularly difficult-to-digest cells, you can add trypsin EDTA digestion solution and place the cells at 37°C to facilitate digestion. After the cells are separated from the bottle wall, immediately add a complete medium containing serum to stop the digestion. Certain proteins in the serum can inhibit the pancreas. Enzyme activity. In general, centrifugation is not necessary. If the cells require serum-free or low-serum medium, centrifuge at 125000g for 5 minutes, then discard the discontinued medium, add appropriate new medium and gently mix the cells before subculture.

The cell passaging ratio is generally 1:2-1:20, depending on the cell type. In the process of passaging, trypsin will damage the cell membrane of some cells. You can use a cell scraper to gently scrape the cells, add an appropriate amount of medium, gently pipette to mix the cells, and transfer them to a new culture flask.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.