كيفية قياس عدد الخلايا الحية في مصنع الخلايا

A cell factory عبارة عن بنية من طبقة واحدة أو متعددة الطبقات لمستهلكات ثقافة الخلية. أثناء عملية زراعة الخلايا ، نحتاج إلى فهم حالة نمو الخلايا في الوقت المناسب قبل الانتقال إلى الخطوة التالية. يمكن الكشف عن عدد الخلايا القابلة للحياة عن طريق تلطيخ التريبان الأزرق. طريقة التشغيل المحددة هي كما يلي:

1. للخلايا الملتصقة ، نضح الوسيط ، أضف محلول الهضم ، ثم هضمه في الحاضنة لوقت مناسب. بعد أن أصبحت الخلايا مستديرة ، تم إنهاء عملية الهضم عن طريق إضافة حجم متوسط ​​أو أكبر من حجم الهضم. بعد الطرد المركزي ، يتم إجراء تعليق الخلية مع وسط الثقافة ؛

2. خذ 0.5 مل من محلول التريبان الأزرق و 0.3 مل من PBS و 0.2 مل من محلول الخلية واخلط جيدًا. ثم يُترك الخليط لمدة 1-2 دقيقة. استخدم ماصة شعيرية أو طرف ماصة صغيرة 10ul لسحب كمية صغيرة من الخليط وحقنها في مقياس الهيموسيتومتر ؛

3. عد ما لا يقل عن 1000 خلية واحسب عدد الخلايا الملطخة ؛

4. اغسل لوحة العد وغطاء الغطاء بالماء عالى النقاء و 75٪ من الإيثانول ؛

5. لن تتلطخ الخلايا الطبيعية ، إلا بعد موت الخلايا ، تصبح نفاذية غشاء الخلية أكبر ، ويدخل أزرق التريبان إلى الخلايا ، وتظهر الخلايا باللون الأزرق. لا ينبغي وضع الخليط لفترة طويلة ، وإلا فإن الخلايا الحية الطبيعية ستشغل الصبغة أيضًا ، مما سيؤثر على دقة العد ؛

6. صلاحية الخلية (٪) = (إجمالي عدد الخلايا - عدد الخلايا الملطخة) / إجمالي عدد الخلايا * 100 ؛

7. مثل طريقة حساب الخلايا ، فإن تلطيخ التريبان الأزرق به خطأ كبير. يمكنه فقط اكتشاف مستوى الاستماتة المبكر ، ولا يمكنه إظهار الفرق بين المجموعة الضابطة والمجموعة التجريبية.

في عملية زراعة الخلايا في مصنع الخلية ، هناك دائمًا بعض الخلايا التي تموت لأسباب مختلفة. يعد إتقان عدد الخلايا الحية وصلاحية الخلية عملية رئيسية في تجارب زراعة الخلايا وطريقة فعالة لضمان تقدم التجربة.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.