English
لوحة زراعة الخلايا هو نوع من الأدوات البيولوجية. وهي مقسمة إلى قاع مسطح وقاع دائري حسب الشكل. عدد الآبار يشمل 6 آبار ، 12 بئراً ، 24 بئراً ، 48 الآبار ، 96 بئراً ، 384 بئراً ، إلخ. وهي تستخدم بشكل أساسي في زراعة الخلايا ويمكن استخدامها أيضاً للقياس يشيع استخدام تركيز البروتين ، 96-بئرًا للكشف عن MTT.
طريقة MTT ، والمعروفة أيضًا باسم طريقة MTT اللونية ، هي طريقة للكشف عن بقاء الخلية ونموها. مبدأ الاكتشاف هو أن نازعة هيدروجين السكسينات في الميتوكوندريا في الخلايا الحية يمكن أن تقلل من MTT الخارجي إلى فورمازان بلوري أزرق أرجواني غير قابل للذوبان في الماء (Formazan) وترسبه في الخلايا ، بينما الخلايا الميتة ليس لها مثل هذه الوظيفة. يمكن لثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO) إذابة الفورمازان في الخلايا ، وتقاس قيمة امتصاص الضوء عند 570 نانومتر بمقايسة مناعية مرتبطة بالإنزيم ، والتي يمكن أن تعكس بشكل غير مباشر عدد الخلايا الحية. ضمن نطاق معين من أرقام الخلايا ، تتناسب كمية تكوين بلورات MTT مع عدد الخلايا. خطوات الكشف هي كما يلي:
1.
الثقافة الخلايا في 96-لوحة ثقافة خلية بئر . بعد أن تكون كثافة الخلية مناسبة ، أضف 50ul MTT لكل بئر واستمر في الثقافة لمدة 4 ساعات ؛
2.
تخلص من وسط الثقافة الذي يحتوي على MTT وأضف 150ul من DMSO. اهتزاز أفقيًا لمدة 10 دقائق لإذابة البلورات تمامًا. للخلايا المعلقة ، بعد الطرد المركزي ، تمتص الوسيط ، ثم أضف DMSO لتذوب ؛
3. قم بقياس الامتصاصية عند 550 نانومتر على أداة المقايسة المناعية المرتبطة بالإنزيم (ضع مجموعة تحكم معقولة ومجموعة فارغة) ؛
4. معدل بقاء الخلية = قيمة الامتصاصية للمجموعة التجريبية / قيمة الامتصاص للمجموعة الضابطة * 100٪.
وتجدر الإشارة أثناء العملية إلى أن MTT مادة مسرطنة. إذا أمكن ، حاول ارتداء نوع من القفازات الشفافة. يجب أن تكون MTT المحضرة معقمة. MTT حساس جدا للبكتيريا. لا يهم إذا أضفت إلى لوحة زراعة الخلايا المكونة من 96 بئرًا دون حمايتها من الضوء. ، بعد كل شيء ، الوقت قصير ، أو يمكنك إطفاء الإضاءة على وحدة التحكم.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.