1. تجاهل وسيلة الثقافة الأصلية في قارورة ثقافة الخلية المليئة بالخلايا. لديك رقبة مستقيمة ، صعر ، زاوية عنق ، مثلث ، مستطيل ، إلخ. وفقًا لأشكال مختلفة. تشمل المواصفات 25 مل و 75 مل و 175 مل و 250 مل. تُستخدم الأحجام الأصغر في الغالب لتمرير الخلايا ، والحفاظ على الخلايا ، وتوفير الخلايا للتجارب ، وما إلى ذلك. مشبع. من أجل تمكين الخلايا من الاستمرار في النمو وزيادة عدد الخلايا ، يجب أن تتم تربيتها (إعادة زراعتها). الثقافة الفرعية هي أيضًا طريقة للحفاظ على أنواع الخلايا. في الوقت نفسه ، إنها عملية ضرورية لإجراء تجارب مختلفة باستخدام الخلايا المستنبتة. يمكن فصل الخلايا المعلقة مباشرة ، بينما تحتاج الخلايا الملتصقة إلى أن يتم هضمها قبل أن يتم فصلها. الخطوات المحددة هي كما يلي:
2. أضف 0.5-1 مل من محلول بنكرياتين 0.25٪ ، بحيث تنغمس الخلايا الموجودة في أسفل الزجاجة في المحلول.
3. ضع سدادة مطاطية على الزجاجة وضعها تحت مجهر مقلوب لمراقبة الخلايا. مع مرور الوقت ، تميل الخلايا الملتصقة الأصلية تدريجياً إلى أن تكون مستديرة ، ويتم التخلص من البنكرياتين عندما لم تطفو الخلايا بعد ، وأضيف 10 مل من وسط المزرعة لإنهاء الهضم. يمكن أيضًا مراقبة الهضم بالعين المجردة. عندما يُرى الجزء السفلي من الزجاجة أبيض وتظهر ثقوب دقيقة ، يمكن إنهاء عملية الهضم. عموما ، وقت الهضم في درجة حرارة الغرفة حوالي 1-3 دقائق.
4. استخدم ماصة لتفجير الخلايا الملتصقة في تعليق ، وقسمها إلى زجاجتين إلى ثلاث زجاجات ، وقم بتوصيل محلول الثقافة بسدادة مطاطية ، ثم ضعه عند 37 درجة مئوية لمواصلة الزراعة. لاحظ النمو الملتصق في اليوم التالي
أعلاه هو تطبيق
في تمرير الخلية. طريقة تحضير محلول الهضم هي كالتالي: تزن 0.25 جم التربسين (نشاط 1: 250) ، يضاف 100 مل Ca2 + ، Mg2 + محلول هانك الخالي للإذابة ، التصفية ، التعقيم بالترشيح ، التخزين في 4 درجات مئوية ، والعودة إلى درجة الحرارة عند 37 درجة مئوية قبل الاستخدام. يمكن أيضًا إضافة EDTA إلى محلول البنكرياتين لجعل التركيز النهائي يصل إلى 0.02٪.
قوارير زراعة الخلاياcell culture flasks in cell passaging. The preparation method of digestion solution is as follows: Weigh 0.25g trypsin (activity 1:250), add 100ml Ca2+, Mg2+-free Hank’s solution to dissolve, filter Sterilize by filtration, store at 4°C, and return to temperature at 37°C before use. EDTA can also be added to the pancreatin solution to make the final concentration reach 0.02%.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.