الكشف عن نشاط الخلايا في مصانع الخلايا - طريقة MTT

مادة مستهلكة تُستخدم غالبًا في زراعة الخلايا الملتصقة. أثناء التجربة ، نحتاج إلى فهم حالة نمو الخلايا في الوقت الفعلي وإجراء التعديلات المناسبة وفقًا للحالة المحددة. يمكن الكشف عن قابلية الخلية للبقاء من خلال طريقة MTT لتحديد نمو الخلية. طريقة MTT ، والمعروفة أيضًا باسم طريقة MTT اللونية ، هي طريقة للكشف عن بقاء الخلية ونموها. مبدأ الكشف هو أن إنزيم نازعة الهيدروجين في الميتوكوندريا في الخلايا الحية يمكن أن يقلل MTT الخارجي إلى فورمازان بلوري أزرق أرجواني غير قابل للذوبان في الماء ويترسب في الخلايا ، بينما الخلايا الميتة ليس لها مثل هذه الوظيفة. يمكن لثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO) إذابة فورمازان في الخلايا ، ويمكن قياس قيمة امتصاص الضوء عن طريق مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم بطول موجة 570 نانومتر ، والذي يمكن أن يعكس بشكل غير مباشر عدد الخلايا الحية. ضمن نطاق رقم خلية معين ، يتناسب مقدار تكوين بلورات MTT مع رقم الخلية. تم استخدام هذه الطريقة على نطاق واسع في الكشف عن نشاط بعض العوامل النشطة بيولوجيًا ، وفحص الأدوية المضادة للأورام على نطاق واسع ، واختبار السمية الخلوية ، ومقايسة الحساسية الإشعاعية للورم. يتميز بحساسية عالية واقتصاد. مصنع الخلية

قبل اختبار صلاحية الخلايا في مصنع الخلايا ، فإن الخطوة المهمة للغاية هي صياغة MTT. عادةً ما يكون تركيز MTT في هذه الطريقة 5 مجم / مل. لذلك ، يمكن وزن 0.5 جم من MTT ، وإذابته في 100 مل من محلول ملحي مخزّن من الفوسفات (PBS) أو وسط خالٍ من الفينول الأحمر ، ويتم ترشيحه باستخدام مرشح 0.22 ميكرومتر لإزالة البكتيريا في المحلول ، وتخزينه عند 4 درجات مئوية في الظلام. . . أثناء التحضير والتخزين ، حاول تغليف الحاوية برقائق الألومنيوم.

عند استخدام طريقة MTT لقياس نشاط الخلية في مصنع الخلية ، يجب ملاحظة أن MTT مادة مسرطنة ، لذا كن حذرًا عند استخدامها. يمكن استخدام هذه الطريقة فقط لاكتشاف رقم الخلية النسبي والصلاحية النسبية ، ولكن ليس رقم الخلية المطلق. عند اختبار النتائج باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية ، من أجل ضمان خطية النتائج التجريبية ، يجب أن يكون امتصاص MTT في نطاق 0-0.7 قدر الإمكان.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.